Întrebări și răspunsuri despre selecția consumabilelor PCR?

După cum se spune, dacă un muncitor vrea să facă o treabă bună, trebuie mai întâi să-și ascute uneltele. Alegerea consumabilelor este foarte importantă pentru a obține rezultate satisfăcătoare ale experimentului PCR. Atunci când analizăm rezultatele PCR, ne concentrăm adesea pe analiza primerilor, concentrația enzimelor, temperatura și timpul, dar ignorăm că consumabilele PCR sunt, de asemenea, unul dintre factorii de influență. Există multe tipuri de consumabile PCR, cum să alegeți consumabilele potrivite pentru PCR? Iată câteva întrebări care vă vor ajuta să găsiți răspunsul.

consumabile pcr

1. De ce consumabilele PCR sunt în general fabricate din PP?

Fie că este vorba despre PCR obișnuită sau PCR cantitativă cu fluorescență în timp real (qPCR), de obicei, consumabilele sale vor fi în contact direct cu reactivii sau probele, astfel încât în ​​procesul de producție și preparare sunt necesare materiale de înaltă calitate și tehnici bune de procesare. Consumabilele generale sunt fabricate din polipropilenă (PP). Polipropilena (PP) este un material biologic inert, suprafața nu este ușor de aderat la biomolecule și are o bună rezistență chimică și toleranță la temperatură.

2. Cum să alegi tuburi/plăci PCR cu volume diferite?

Volume obișnuite pentru tuburi/plăci PCR:

• Tub unic/{{0}}tub/12-tub: 0,5 ml, 0,2 ml, 0,1 ml

• {{0}}placă de godeuri: 0,2 ml, 0,1 ml

• {{0}}placă de godeuri: 0,02 ml

Specificații pentru tuburi/plăci PCR:

Selectați produsul potrivit în funcție de cerințele experimentale specifice. Volumul majorității tuburilor PCR poate îndeplini cerințele reacțiilor PCR. Specificațiile de capacitate sunt disponibile în capacitate standard și capacitate redusă. În general, se recomandă să alegeți mai întâi tuburile de capacitate mică. Deoarece tuburile/plăcile de reactoare cu volum redus au mai puțin spațiu la cap, transferul de căldură este îmbunătățit și evaporarea este redusă. În același timp, este necesar să se evite adăugarea de prea multă sau prea puțină probă atunci când se adaugă probe. Prea mult poate duce la scăderea conductibilității termice, scurgeri și contaminare încrucișată, în timp ce prea puțin poate cauza pierderi prin evaporare a probei.

3. Care este diferența dintre capacul plat/capacul convex al unui singur tub sau al tubului 8-rând?

Când volumul eșantionului este mic, se preferă tuburi unice sau tuburi {{0}}tuburilor. Cu toate acestea, atunci când necesarul de volum de reacție este mare, tuburile individuale prevalează, iar volumul poate ajunge la 0,5 ml. Există două tipuri de tub unic și 8-tub tub cu capac plat și capac convex, fiecare având propriile sale avantaje. Capacul plat asigură livrarea precisă a semnalului fluorescent pentru qPCR; ușor de scris pe markere. Capacul convex este în contact cu capacul instrumentului PCR pentru a reduce deformarea tubului cauzată de presiune; cu toate acestea, va afecta transmisia semnalelor fluorescente și nu poate fi aplicată experimentelor qPCR.

4. Care sunt diferențele dintre scenariile de utilizare ale diferitelor 96-plăci de godeuri?

96-plăcile pentru godeuri sunt, în general, împărțite în plăci fără bordură, plăci cu semiconjunturi și plăci cu borduri întregi.

Plăci fără fustă: compatibile cu majoritatea termocicloarelor sau mașinilor qPCR, dar nu sunt potrivite pentru aplicații automate. Stabilitatea nu este ridicată în timpul procesului de pipetare și trebuie utilizat cu un suport pentru plăci.

Placă semi-fustă: poate fi adaptată pentru etichetarea sau aplicarea codului de bare și aplicarea automată și are stabilitate bună la pipetare.

Placa de fusta completa: foarte potrivita pentru aplicatii automate de laborator, dar potrivita si pentru aplicatii de etichete si coduri de bare. Rezistență mecanică bună, potrivită pentru mașinile PCR cu module proeminente și stabilitate ridicată în timpul pipetării.

5. Materialul plăcii/tubului PCR este mai gros și mai stabil?

Nu. Consumabilele PCR trebuie să aibă o grosime uniformă a peretelui pentru a asigura un transfer consistent de căldură. Peretele tubului ultra-subțire este cu 50% mai subțire decât versiunea standard, ceea ce poate reduce și mai mult bariera termică, rezultând un răspuns mai rapid și mai bun.

6. Pentru plăcile cu 96-godeuri sau 384-puţuri, de ce colţurile tăiate şi etichetele nu sunt aceleaşi?

Tăierea colțurilor: Alegerea poziției de tăiere a colțurilor a plăcii PCR depinde de cerințele instrumentului adaptat pentru o poziționare ușoară.

Identificare: Marcajele alfanumerice de pe plăcile PCR ajută la identificarea godeurilor individuale și a locațiilor probelor. În general, este un logo cu număr de culoare în relief sau un logo gravat. Pentru unele experimente de aplicare automată, placa de reacție cu semne imprimate va fi mai bine etanșată.

7. Unele godeuri ale plăcii PCR sunt proeminente, în timp ce altele sunt plate. Care este mai bun?

Ceea ce este potrivit este bine. Plăcile PCR obișnuite au două tipuri: margini plate și margini ridicate. Placă de reacție cu margine plată, potrivită pentru majoritatea termocicloarelor. Placa de reacție de pe marginea orificiului de ridicare este convenabilă pentru etanșare, ceea ce poate reduce riscul de contaminare încrucișată între probe.

8. Cum să alegi tuburi/plăci PCR de diferite culori?

Pentru reacțiile PCR obișnuite, pot fi utilizate cele transparente. În reacția PCR în timp real, sensibilitatea și consistența tubului alb sunt relativ mai mari. Pereții tubului alb împiedică trecerea fluorescenței prin pereții tubului și refracția, împiedicând astfel trecerea fluorescenței către modulul de încălzire, să fie absorbită de modul sau să se reflecte inconsecvent. În comparație cu tuburile transparente, semnalele de fluorescență mai puternice și mai concentrate pot fi colectate în partea de sus a tuburilor albe.